ООО «Лабораторная Диагностика»
ООО «Лабораторная Диагностика» info@LD.ru    тел.: +7 495 369-20-43
 Главная   Новости   О компании  Каталог продукции и цены   Оформить заказ   Контакты 
 
  
Каталог продукции
  Гематология  
  Гемостаз  
  Иммуногематология  
  Иммуногистохимия
  Иммуноферментный анализ (ИФА)
  Иммунохимия  
  Клеточные технологии  
  Клиническая биохимия
  Коагулометрия  
  Микробиология  
  Мультиплексный анализ  
  Оборудование для биохимии и
  молекулярной биологии
  Общелабораторное оборудование
  Онкология  
  Пищевая промышленность  
  Программное обеспечение  
  Проточная цитометрия
  ПЦР-лаборатория
  Рекомбинантные белки
  Репродуктивные технологии
  Сортировка клеток
  Спектрофотометрия  
  Стволовые клетки (Stem Cells)
  Трансплантология
  Цитогенетическая диагностика
  Экспресс-лаборатория  

 
/ Обзоры и публикации

Принцип процедуры тестирования Double Antibody Sandwich ELISA (DAS ELISA)

I. Принцип процедуры тестирования Double Antibody Sandwich ELISA

Наличие патогена доказывается при помощи твердофазного иммуноферментного анализа по методике "сэндвич“ с использованием двух поликлональных антител.
Ha первой стадии инкубации происходит иммобилизация специфическиx антител иммуноглобулинов группы Г (IgG) на внутренней поверхности лунок 96-луночного микропланшета.

На второй стадии инкубации добавляют раствор, содержащий анализируемый антиген. Антиген реагирует с иммобилизованным антителом и образуется комплекс антиген-антитело. Во время третьей стадии инкубации в лунки добавляют специфические антителa, меченые ферментом щелочная фосфатаза (Alkalische Phosphatase AP) или конъюгат. В результате образуется специфический иммунокомплекс антитело-антиген-антитело-АР-конъюгат.

Далее следует ферментативная реакция щелочной фосфатазы AP с бесцветным субстратом 4-нитрофенилфосфат, при которой образуется свободный 4-нитрофенол, придающий раствору жёлтый цвет. Интенсивность окраски при этом пропорциональна количеству фермента, а следовательно количеству исследуемого антигена. Результат оценивается спектрофотометрически при 405 нм после 1-го часа инкубации.

II. Проведение теста

*Промывка: После каждого инкубационного шага необходимо удалить реагент из лунок и промыть необходимое
количество раз (указано в таблице). При использовании автоматичекого промывочного устройства уменьшить
количество промывок до 4-х раз.

III Формулировки

Оценка: Мы рекомендуем иcпользовать при каждом тесте лиофилизованные препараты, дающие
положительные и отрицательные контрольные реакции, что даёт контроль качествa проведённого анализа. Для
исключения неспецифических реакций необходимо также тестировать свежий сок здоровых растений одного и
того же вида.

   
© ООО «Лабораторная Диагностика»
info@LD.ru   тел.: +7 495 369-20-43