Гепариназа I Bacteroides (12 000 е.а./мл, 240 е.а.)

Бактероидная гепариназа I, также называемая гепаринлиазой I, активна в отношении гепарина и высокосульфатированных доменов гепарансульфата. В результате реакции образуются олигосахаридные продукты, содержащие ненасыщенные уроновые кислоты, которые можно обнаружить с помощью УФ-спектроскопии при 232 нм.

Рекомбинантный фермент без обнаруживаемой контаминирующей активности гликозидазы, сульфатазы или уроназы
Чистота ≥95%, как определено с помощью SDS-PAGE и интактного ESI-MS
Оптимальная активность и стабильность до 12 месяцев при хранении в растворе при температуре -80°C.
Оптимален для использования в исследованиях коагуляции

Гепариназа I, клонированная из Bacteroides eggerthii, также называемая гепаринлиазой I, активна в отношении гепарина и высокосульфатированных доменов гепарансульфата. В результате реакции образуются олигосахаридные продукты, содержащие ненасыщенные уроновые кислоты, которые можно обнаружить с помощью УФ-спектроскопии при 232 нм.

Bacteroides Heparinase I расщепляет гликозидную связь между N-сульфатированными гексозаминами и остатками 2-O-сульфатированных идуроновых кислот, между ними, а также остатками 2-O-сульфатированных глюкуроновых кислот. Остаток 2-O-сульфатированной уроновой кислоты необходим для активности Bacteroides Heparinase I, а 6-O-сульфатирование GlcNS не препятствует активности фермента.

Источник продукта

Клонированы из Bacteroides Eggerthii

Определение единицы измерения

Одна единица определяется как количество фермента, которое высвобождает 1,0 мкмоль ненасыщенных олигосахаридов из гепарина слизистой оболочки свиньи в минуту при 30°C и pH 7,0 в общем реакционном объеме 100 мкл.

Анализ определения единицы измерения.
Двукратно разведенные Bacteroides Heparinase I инкубируют с 1 мг/мл субстрата гепарина слизистой оболочки свиньи в 1X реакционном буфере Bacteroides Heparinase в 100 мкл реакционной смеси. Реакционную смесь инкубируют при 30°С. Высвобождение ненасыщенных олигосахаридов обнаруживают с помощью УФ-спектроскопии в реальном времени при 232 нм.

Условия реакции

1X буфер для реакции Bacteroides Heparinase
Инкубировать при 30°C

Буфер хранения

20 мМ Трис-HCl
100 мМ NaCl
5 мМ CaCl ₂
1 мМ ЭДТА
pH 7,5 при 25°C

Тепловая инактивация

100°C в течение 1 минуты

Молекулярная масса

Видимый: 42 кДа

Сопутствующие товары

Примечания к продукту

Избегайте повторяющихся циклов замораживания-оттаивания.
Условия реакции:
1. Объедините 10 мкл гепаринового субстрата с концентрацией 1 мг/мл, 10 мкл буфера для реакции Bacteroides Heparinase и H ₂ O в общем реакционном объеме 100 мкл.
2. Добавьте 1 мкл Bacteroides Heparinase I.
3. Инкубируйте реакционную смесь при 30°C в течение 1-24 часов (контролируйте поглощение при 232 нм для определения частичного или полного переваривания).
Оптимальное время инкубации и концентрации ферментов должны быть определены эмпирически для конкретного субстрата.

использованная литература

Лэндри Д. и др. New England Biolabs, Inc. Неопубликованное наблюдение.
Ямада С., Мураками Т., Цуда Х., Йошида К., Сугахара К. (1995). J. Biol.Chem . 270, 8696-8705.
Торговец З.М., Ким Ю.С., Райс К.Г., Линхардт Р. (1985). J. Biol.Chem . 229, 369-377.

Информация для заказа

Область использования: Гепариназы	Производство:	New England Biolabs
	Метод:
	Объем:
	Кат. номер:	P0735 S
Цена (с НДС 20%):	по запросу	В корзину
Наименование: Гепариназа I Bacteroides (12 000 е.а./мл, 240 е.а.). Примечание: