Exonuclease V (RecBCD) / Экзонуклеаза V (RecBCD), 1 тыс.ед.

ДНК-специфическая экзонуклеаза, которая также действует как эндонуклеаза на одноцепочечной ДНК.
Инициируется как на 5 ', так и на 3' концах линейной двухцепочечной ДНК.
Расщепляет линейную двухцепочечную ДНК как в направлениях от 3' к 5', так и от 5' к 3'
Требует АТФ в реакции

Экзонуклеаза V идеально подходит для:

Деградация загрязняющей линейной ДНК в образцах плазмид
Удаление остаточной гДНК после очистки низкокопийной плазмиды

Экзонуклеаза V, комплекс RecBCD из E. coli , обладает несколькими различными ферментативными активностями, включая АТФ-зависимую активность эндонуклеазы одноцепочечной ДНК, активность экзонуклеазы одноцепочечной ДНК и двуцепочечной ДНК. Гидролиз в каждом случае является двунаправленным (как с 3'-, так и с 5'-концов) и процессным с образованием олигонуклеотидов (1,2,3). Для всех активностей экзонуклеазы V требуются двухвалентные катионы. Mg ² необходим для экзонуклеазной активности, в то время как Ca ² ингибирует экзонуклеазную активность и позволяет раскручивать двухцепочечную ДНК (хеликазная активность) без гидролиза (4,5).

Источник продукта

Штамм E. coli , содержащий плазмиды для экспрессии трех субъединиц экзонуклеазы E. coli.

Преимущества и особенности

Возможности приложения

Деградация линейной одноцепочечной и двуцепочечной ДНК при сохранении ДНК с разрывами и суперскрученной плазмидной ДНК.

Свойства и использование

Определение единицы измерения

Одна единица определяется как количество фермента, необходимое для получения 1 нмоль растворимого в кислоте дезоксирибонуклеотида из двухцепочечной ДНК за 30 минут при 37°С в общем реакционном объеме 50 мкл.

Условия реакции

1X NEBuffer™ 4
Supplement с 1 мМ АТФ
Инкубировать при 37°C

1X NEBuffer™ 4
50 мМ ацетат калия
20 мМ трис-ацетат
10 мМ ацетат магния
1 мМ DTT
(pH 7,9 при 25°C)

Буфер хранения

50 мМ Tris-HCl
100 мМ NaCl
1 мМ DTT
0,1 мМ ЭДТА
50 % глицерин
0,1 % Triton® X-100
pH 7,5 при 25°C

Тепловая инактивация

70°С в течение 30 минут

Условия анализа единицы измерения

1X NEBuffer 4, 1 мМ АТФ с 0,15 мМ обработанного ультразвуком дуплекса [ ³ H]-ДНК.

сопутствующие товары

Сопутствующие товары

Материалы продаются отдельно

НЕБуфер 4

использованная литература

Эйхлер, округ Колумбия, и соавт. (1977). Дж. Биол. хим . 252, 499-503.
Тейлор, А. Ф. и соавт. (1985). Дж. Мол. биол . 185, 431-443.
Амундсен, С.К. и соавт. (1986). проц. Натл. акад. науч . 83, 5558-5562.
Палас, К.М. и соавт. (1990). Дж. Биол. хим . 265, 3447-3454.
Диллингем, М.С. и соавт. (2008). Микробиология и мол. биол. Обзор . 72, 642-671.

Информация для заказа

Область использования: Прочие реагенты для научных исследований	Производство:	New England Biolabs
	Метод:
	Объем:
	Кат. номер:	M0345S
Цена (с НДС 20%):	по запросу	В корзину
Наименование: Exonuclease V (RecBCD) / Экзонуклеаза V (RecBCD), 1 тыс.ед.. Примечание: