Наборы для апоптоза TUNEL FineTest

Апоптоз — генетически запрограммированная гибель клеток, которая приводит к их разборке и удалению.

1. Рецептор-зависимый.
2. Митохондриальный.
3. Апоптоз, связанный с эндоплазматическим ретикулумом.
4. Лизосомно-зависимый.

• Морфогенетический участвует в разрушении различных тканевых зачатков.
• Гистогенетический наблюдается при дифференцировке тканей и органов.
• Филогенетический участвует в удалении рудиментарных структур у эмбриона, например, пронефроса.

Для изучения апоптоза (программируемой клеточной гибели) используют разные методы, которые могут быть морфологическими, биохимическими, генетическими или функциональными. Выбор метода зависит от задач исследования и технических возможностей лаборатории. 

Метод TUNEL (TdT dUTP Nick End Labeling ) предназначен для количественной оценки степени фрагментации ДНК на поздней стадии апоптоза.

Суть метода заключается в выявлении разрывов ДНК, возникающих под действием эндонуклеаз.

На начальных этапах апоптоза величина фрагментов составляет 50–300 т.п.н., поздние стадии апоптоза характеризуются образованием фрагментов размером 180-200 п.н.

Характерной чертой данного этапа является образование большого числа 3'-ОН-концов.

Терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза (TdT) представляет собой независимую от матрицы ДНК-полимеразу, которая катализирует связывание дезоксинуклеотидов с 3'-ОН-концами фрагментов ДНК.

Для оценки степени фрагментации ДНК в реакционную среду вводится меченный флуорофорами дезоксиуридинтрифосфат (dUTP), который под действием фермента TdT встраивается в 3'-OH-конец.

Интенсивность флюоресценции обратно пропорциональна величине фрагментов ДНК: при полном расщеплении на фрагменты величиной 180-200 п. сигнал будет наиболее ярким, так как количество разрывов ДНК в этом случав максимальное.

Детекция флуоресценции осуществляется с помощью флуоресцентной микроскопии или проточной цитометрии.

Данный набор реагентов предназначен для выявления апоптотических клеток в срезах тканей, фиксированных парафином, срезах замороженных тканей, цитологических образцах. 

FineTest предлагает следующие варианты флюорисцентных меток.

Наименование	Объем	Производство	Метод	Кат.Номер
Набор для исследования апоптоза TUNEL in situ (метод HRP-DAB)	100T	Fine Biotech		FNCK105
Одношаговый набор для определения апоптоза TUNEL in situ (зеленый, FineTest®488)	100T	Fine Biotech		FNCK101
Одношаговый набор для определения апоптоза TUNEL in situ (зеленый, FITC)	100T	Fine Biotech		FNCK100-100
Одношаговый набор для определения апоптоза TUNEL in situ (красный, FineTest®555)	100T	Fine Biotech		FNCK104
Одношаговый набор для определения апоптоза TUNEL in situ (красный, FineTest®594)	100T	Fine Biotech		FNCK102
Одношаговый набор для определения апоптоза TUNEL in situ (красный, FineTest®647)	100T	Fine Biotech		FNCK103