Иммуноанализ на основе микросфер LEGENDplex™ от BioLegend позволяет количественно определить количество растворимых аналитов одновременно в биологических образцах с использованием проточного цитометра.
В технологии LEGENDplex используются специальные шарики, специфические антитела на поверхности которых связываются с целевым аналитом. Микросферы отличаются по размеру и уровню флуоресценции, что дает возможность различить и подсчитать их количество с помощью проточного цитофлуориметра. Концентрация аналита подсчитывается на основании стандартной кривой с помощью программного обеспечения LEGENDplex data analysis software, которое распространяется бесплатно. LEGENDplex – это широкий выбор вариантов исследований различных хемокинов и цитокинов человека и мыши.
Наборы BioLegend LEGENDplex поставляются в виде предопределенных панелей, в зависимости от специфики от 3 до 13, или клиенты могут смешивать и сопоставлять любые подмножества в каждой предопределенной панели, используя нашу систему Mix and Match.
Каждый набор содержит достаточное количество реагентов как минимум для 100 анализов. Анализ может быть выполнен в 96-луночном фильтрующем планшете, что позволяет протестировать 40 образцов плюс 8 титров стандартной кривой в двух экземплярах, или их можно проводить в пробирках FACS, где дублирование титрования может не потребоваться.
Для анализа результатов LEGENDplex BioLegend бесплатно предоставляет версии программного обеспечения для анализа данных LEGENDplex для ПК и Mac. Примечание: для полного использования функций программного обеспечения требуется USB-ключ (входит в каждый комплект) для пользователей ПК или бесплатный лицензионный ключ (см. Руководство по установке) для пользователей Mac.
BioLegend LEGENDplex - это иммуноанализ на основе микросфер, в котором используются те же основные принципы сэндвич-иммуноанализов, при которых растворимый аналит захватывается между двумя антителами.
Популяции микросфер бывают двух размеров и различаются по уровням флуоресценции APC, что позволяет их четко отличать друг от друга. Каждый набор микросфер конъюгирован со специфическим антителом на поверхности и служит шариком захвата для этого конкретного аналита. Когда выбранная панель микросфер смешивается вместе и инкубируется с исследуемым образцом, содержащим целевые аналиты, каждый аналит будет связан своими специфическими микросферами.
После промывки добавляются биотинилированные детектирующие антитела, и каждое детектирующее антитело будет связываться со своим специфическим анализируемым веществом, связанным с микросферами. Затем добавляется стрептавидин-фикоэритрин (SA-PE), который будет связываться с биотинилированными антителами для обнаружения, обеспечивая интенсивность флуоресцентного сигнала пропорционально количеству связанного аналита.
Для каждой популяции микросфер интенсивность флуоресценции сигнала РЕ затем количественно определяют с помощью проточного цитометра.
Концентрация конкретного аналита определяется на основе известной стандартной кривой с использованием программного обеспечения для анализа данных LEGENDplex.
Характеристики
Совместим со стандартными проточными цитометрами
Бесплатное программное обеспечение для анализа данных
Отличная производительность анализа
В настоящее время доступны реактивности:
Человек, мышь, крыса, не человек
Максимальное количество аналитов
13
Минимально необходимый объем образца
12,5 мкл сыворотки / плазмы на лунку, 25 мкл для образцов тканевых культур
Требуется инструмент
Проточный цитометр, способный обнаруживать PE и APC (или PerCP / FL3 на приборах без красного лазера)
Иммуноанализ на основе микросфер LEGENDplex™ от BioLegend позволяет количественно определить количество растворимых аналитов одновременно в биологических образцах с использованием проточного цитометра.
