Набор для высокопроизводительного синтеза мРНК in vitro (с ΨTP и m5CTP, с ARCA)
Набор для высокопроизводительного синтеза мРНК in vitro с использованием антиреверсивного аналога кэпа (ARCA) предназначен для реализации реакции транскрипции in vitro с целью получения ARCA‑кэпированных молекул мРНК.
Механизм функционирования набора базируется на ферментативной транскрипции — синтезе РНК на матрице ДНК под действием ДНК‑зависимой РНК‑полимеразы бактериофага T7. Данная полимераза обеспечивает высокую процессивность и точность синтеза транскриптов на линейных ДНК‑матрицах, содержащих промотор T7.
Набор рассчитан на проведение 20 индивидуальных реакций объёмом 50 мкл каждая. В стандартных условиях одна реакция позволяет синтезировать до 100 мкг РНК при использовании 2 мкг контрольной ДНК‑матрицы. Таким образом, суммарный выход РНК с одного набора достигает 2 мг, что соответствует требованиям высокопроизводительных экспериментальных схем.
Для обеспечения функциональной активности синтезированной мРНК критически важна корректная структурная организация молекулы, включающая следующие обязательные элементы:
- кэп‑структуру на 5′‑конце;
- 5′‑нетранслируемую область (5′ UTR);
- корректно ориентированную кодирующую последовательность;
- 3′‑нетранслируемую область (3′ UTR);
- поли(А)‑хвост на 3′‑конце.
Применение ARCA (антиреверсивного аналога кэпа) гарантирует правильную ориентацию кэп‑структуры: за счёт стерических и химических ограничений ARCA встраивается исключительно в физиологически релевантной ориентации. Это обеспечивает 100 % трансляционную активность полученных мРНК, поскольку исключает формирование транскриптов с обратным (нефункциональным) кэпом.
Синтезированные мРНК пригодны для широкого спектра молекулярно‑биологических и клеточных приложений, включая:
- исследование функциональных свойств мРНК;
- микроинъекции в клетки или эмбрионы;
- трансфекцию различных клеточных линий;
- системы трансляции in vitro (например, в бесклеточных системах на основе ретикулоцитов кролика или экстрактов пшеницы);
- иные экспериментальные задачи, требующие применения функционально активных мРНК.
Информация для заказа
| Область использования: | Производство: | БИОЛАБМИКС |
| Метод: | |
| Объем: | 50 мкл |
| Кат. номер: | ARCA-High-mRNA-20 |
| Цена (с НДС 22%): | по запросу | В корзину  |
Наименование: Набор для высокопроизводительного синтеза мРНК in vitro (с ΨTP и m5CTP, с ARCA). Примечание: |