Система детекции UltraVision Quanto Пероксидаза Quanto и ДАБ Quanto

UltraVision Quanto Detection System HRP DAB

СПЕЦИФИЧНОСТЬ:          Анти-мышиный IgG (H+L), Анти-кроличий IgG (H+L)

ФЕРМЕНТ:                           Пероксидаза

ХРОМОГЕН/СУБСТРАТ:   Диаминобензидин (DAB)

РЕАГЕНТЫ в составе (объем стекол 300 - 600) :

 

UltraVision Quanto является технологией десятилетия в полимерной маркировке. Методы полимерной детекции обеспечивают повышенную чувствительность и легкость работы. Микрополимерная инноваицонная технология имеет значительное преимущество перед обычными ИГХ т.к. микрополимер проникает в ядерную мембрану, т.о. окрашивая ядерные антигены, при этом  сохраняя способность корректно окрашивать и мембранные и цитоплазматические антигены.  UltraVision Quanto работает и с мышиными и с кроличьими первичными антителами, т.о. система  универсальна и удобна. UltraVision Quanto не содержит биотина, что препятствует окрашиванию фона, проявляющегося при традиционных методиках окрашивания, базирующихся на использовании биотина. Система дает отличное окрашивание при низкой концентрации антигенов в ткани или при низкой аффиности первичных антител. Это обеспечивается чрезвычайно высокой очисткой вторичных антител и ферментов входящих в систему. 

В итоге UltraVision Quanto обеспечивает быструю, удобную, универсальную ИГХ детекцию способную отлично визуализировать как обычные, так и диагностически сложные случаи.

Принцип метода

Данная система детекции UltraVision выявляет специфичные мышиные IgG или кроличьи IgG антитела, связанные с антигеном в срезах ткани. Место, где находятся специфические антитела, выявляется с помощью универсальных вторых антител, коньюгированных с полимером, меченым ферментом, который выявляет мышиный и кроличий иммуноглобулины. Полимерный комплекс затем визуализируется с помощью соответствующей системы субстрат-хромаген.

Все шаги процедуры проводятся при комнатной температуре.

1. Депарафинизировать и обезводить срез ткани.
2. Промыть  буфером
3. При необходимости, провести высокотемпературную или ферментную демаскировку антигена.
4. Промыть  буфером.
5. Для уменьшения неспецифичного фонового окрашивания из-за эндогенной пероксидазы, инкубировать стекло в Hydrogen Peroxide Block в течение 10 минут.
6. Промыть  буфером.
7. Нанести реагент Ultra V block и инкубировать в течение 5 мин. при комнатной температуре с целью блокирования неспецифических реакций фонового окрашивания. ПРИМЕЧАНИЕ: период инкубации не должен  превышать 10 мин., иначе желаемый эффект окрашивания может снизиться. (Можно опустить при растворении первичных антител в буферном растворе, содержащей 5-10% нормальной козьей сыворотки.)
8. Промыть.
9. Нанести первые антитела и инкубировать в соответствии с протоколом производителя.
10. Промыть  буфером.
11. Нанести  PrimaryAntibodyAmplifierQuantoи инкубировать в течение 10 мин при комнатной температуре.
12. Промыть  буфером.
13. Нанести HRPPolymerQuantoи инкубировать в течение  10 минут при комнатной температуре. (ПРИМЕЧАНИЕ: Полимер HRP чувствителен к свету. Избегайте лишнего светового воздействия и храните в непрозрачном сосуде.)
14. Промыть  буфером.
15. Добавить 1 каплю (30 µl) DABChromogenQuanto к 1 мл DABSubstrateQuanto, перемешать круговым движением и нанести на срез. Инкубировать в течение 5 минут, в зависимости от желаемой степени окрашивания.
16. Промойте 4 раза в дистиллированной воде.
17. Производить контрастное окрашивание и применение покровных стёкол с использованием постоянных заливочных сред.

Специфичность и чувствительность метода детекции антигенов зависит от типа используемого  специфического первого антитела.

Ссылки

Shan-Rong Shi, James Guo, Richard J. Cote, Lillian Young, Debra Hawes, Yan Shi, Sandra Thu, and Clive R. Taylor, Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology, vol 7, 201-208, 1999.

Спецификация

Регистрационное удостоверения и пункт РУ	ФСЗ 2011/11315, пункт 2

Информация для заказа

Область использования: Системы детекции для иммуногистохимии	Производство:	Thermo Fisher Scientific
	Метод:	Иммуногистохимия
	Объем:	60 ml
	Кат. номер:	TL-060-QHD
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Система детекции UltraVision Quanto Пероксидаза Quanto и ДАБ Quanto / UltraVision Quanto Detection System HRP DAB. Примечание: ФСЗ 2011/11315 поз. 2