ООО «Лабораторная Диагностика»
ООО «Лабораторная Диагностика»  
 Главная   Новости   О компании  Каталог продукции и цены   Оформить заказ   Контакты 
 
  
Каталог продукции
  Проточная цитометрия
  Проточный цитометр MACSQuant
  Реагенты для проточной
  цитометрии
  Гематология  
  Гемостаз  
  Иммуногематология  
  Иммуногистохимия
  Иммуноферментный анализ (ИФА)
  Иммунохимия  
  Клеточные технологии  
  Клиническая биохимия
  Коагулометрия  
  Микробиология  
  Мультиплексный анализ  
  Оборудование для биохимии и
  молекулярной биологии
  Общелабораторное оборудование
  Онкология  
  Пищевая промышленность  
  Программное обеспечение  
  ПЦР-лаборатория
  Рекомбинантные белки
  Репродуктивные технологии
  Сортировка клеток
  Спектрофотометрия  
  Стволовые клетки (Stem Cells)
  Трансплантология
  Цитогенетическая диагностика
  Экспресс-лаборатория  

 
/ Каталог / Проточная цитометрия / Реагенты для проточной цитометрии / Диагностические наборы для проточной цитометрии

Набор для количественной оценки CD34 клеток

CD34 Count Kit

Набор для количественной оценки CD34 клетокНабор реагентов для достоверной оценки абсолютного количества жизнеспособных CD34 клеток

  • Подходит для воспроизведения ISHAGE протокола
  • Оценка одновременно всех параметров в одной пробирке
  • Высокая точность
  • Легкость интерпретации
  • Для in vitro диагностики методом проточной цитометрии

Актуальность

Трансплантация гемопоэтических клеток используются для лечения злокачественных заболеваний крови и генетических нарушений. Изначально костный мозг являлся единственным источником для пересадки гемопоэтических клеток, однако, за последнее десятилетие широкое распространение получило использование периферических стволовых клеток крови для восстановления гематопоэза. Успех трансплантации в первую очередь зависит от общего количества CD34+ клеток в донорском материале. Традиционным является определение CD34 клеток с использованием гемоцитометра для подсчета количества лейкоцитов, и анализ на проточном цитофлюориметре для определения содержания CD34 клеток относительно количества лейкоцитов (более подробно метод описан во вложении и в указанных ссылках).

Набор CD34 Count kit позволяет оценить абсолютное количество CD34 положительных клеток в образцах периферической крови пациентов после мобилизации и в продуктах лейкофереза с использованием только проточной цитометрии.

Определение содержания CD34+ клеток

Поскольку проточная цитометрия обеспечивает одновременный анализ количественных и качественных характеристик CD34+ клеток, этот метод стал важнейшим для “on-line” мониторинга выхода CD34+ клеток и для определения оптимального времени для заготовки трансплантата.

Однако количество CD34+ клеток, подсчитываемых с помощью проточной цитометрии, может значительно отличаться в зависимости от стратегии гейтирования, используемых моноклональных антител, флюорохромов и лизирующих растворов. Поэтому, стандартизация измерений на проточном цитометре очень важна для получения достоверных и сопоставимых результатов.

Попытки стандартизировать подсчет CD34+ клеток привели к созданию нескольких рекомендаций, таких как Milan, Nordic и ISHAGE. На сегодняшний день, «золотым стандартом» большинство пользователей признают протокол ISHAGE.

Набор для достоверного определения абсолютного количества жизнеспособных CD34+ клеток

Для точного, достоверного и воспроизводимого определения количества CD34+ клеток, компанией Dako разработан набор CD34 Count Kit, который совместим с протоколом ISHAGE.

Набор обеспечивает выполнение четырех параметровой стратегии вышеуказанного протокола и включает два антитела, анти-человеческий CD34 и анти-человеческий CD45. Кроме того, он содержит CytoCount, суспензию флюоресцентных микросфер, которые используются в качестве референсной популяции для подсчета абсолютных значений CD34+.

В дополнении, набор содержит EasyLyse, не требующий отмывки и фиксации, аммониум хлоридный реагент для лизиса эритроцитов, а так же раствор для определения жизнеспособности 7-аминоактиномицин D (7-AAD), который позволяет исключить мертвые клетки из анализа.

* - 7-амино-актиномицин D (7-AAD) – это готовый к использованию краситель нуклеиновых кислот, который может быть использован вместо пропидий йодида для исключения из анализа мертвых клеток при исследовании методом проточной цитометрии. Возможность использования 7-AAD в сочетании с моноклональными антителами, меченными RPE и FITC, является преимуществом данного красителя по сравнению с пропидий йодидом, так как перекрывание спектров эмиссии 7-AAD, RPE, FITC минимально. Флюоресценция 7-AAD измеряется в красном диапазоне спектра.

Высокая точность

Следующие особенности CD34 Count Kit способствуют повышению точности измерений количества жизнеспособных CD34+ клеток:

  • отсутствие процедур отмывки и фиксирования образца для уменьшения клеточной потери
  • идентификация и подсчет жизнеспособных CD34+ клеток с помощью раствора 7-аминоактиномицина D

Оптимальность процедуры анализа

Поскольку при работе с CD34 Count Kit используется протокол ISHAGE, это позволяет оптимизировать анализ за счет:

  • уменьшения объема образца
  • снижения трудоемкости
  • уменьшения стоимости исследования по сравнению с традиционным 

Простота в использовании

CD34 Count Kit очень прост в применении (содержит подробные инструкции). Флаконы пронумерованы в соответствии с порядком использования.

Набор был создан и оптимизирован согласно рекомендациям ISHAGE для проточной цитометрии.

Основные этапы пробоподготовки:

1. Добавьте 100 мкл образца в тест-пробирку.
2. Внесите 10 мкл смеси антител (анти-CD45/FITC+ анти-CD34/RPE) и инкубируйте в течении 15 минут.
3. Добавьте 2 мл EasyLyseTM (лизирующий раствор) и инкубируйте 10 минут.
4. Добавьте 10 мкл 7-AAD и инкубируйте 5 минут
5. Добавьте 100мкл CytoCount (референсные частицы), перемешайте пипетированием.
6. Анализируйте на проточном цитометре и определите абсолютное количество жизнеспособных CD34+ клеток, используя протокол гейтирования ISHAGE.

Подробности пожалуйста смотрите в инструкции к К2370

Дополнительные материалы

Листовка Dako CD34 Count Kit на английском языке

Инструкция к набору CD34 Count Kit

Информация для заказа:

Область использования:Производство:Dako
Метод:Проточная цитометрия 
Объем:50 duplicate тестов 
Кат. номер:K237011
Цена (с НДС 10%):по запросуВ корзину
Набор для количественной оценки CD34 клеток / CD34 Count KitНаименование: Набор для количественной оценки CD34 клеток / CD34 Count Kit.
Примечание: Набор реагентов для достоверной оценки абсолютного количества жизнеспособных CD34+ клеток
дополнительная информация (на английском языке). Leukapheresis sample. CD45/FITC vs. CD34/RPE. R6 is set around the CytoCount™ Beads. The red population is the CD34+ stem cells.
   
© ООО «Лабораторная Диагностика»,  info@LD.ru
телефоны: +7 (495) 461-67-60, +7 (499) 348-25-72